PCR共分几步?

wxfar 1年前他留下的回答 已收到4个回答

wxf13579 网友

该名网友总共回答了14个问题，此问答他的回答如下：采纳率：85.7%

标准的PCR过程分为三步：
1.DNA变性
　　（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA
2.退火
　　（25℃-65℃）：系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链.
3.延伸
　　（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右,活性最佳）的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链.
　　每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量即增加一倍.如图所示：
　　现在有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了反应速度.

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zhuanshijiezhi 网友

该名网友总共回答了15个问题，此问答他的回答如下：采纳率：80%

预反映-变性-退火-链延伸-充分延伸

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lalac83 网友

该名网友总共回答了1个问题，此问答他的回答如下：

PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法，主要由高温变性、 低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成：即在高温（95℃）下，待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板；而后在低温（37～55℃）情况下，两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合，形成部分双链；在Taq酶的最适温度（72℃）下，以引物3’端为合成的起点，以单核苷酸为原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA新...

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lxzckiousa 网友

该名网友总共回答了1个问题，此问答他的回答如下：

1，准备试剂
2，准备DNA
3，按照步骤加样
4，混匀
5，上机PCR
that's all

1年前他留下的回答

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