基因文库是怎么回事?课本上说,当不知道目的基因序列的时候,则需要建立基因文库获取目的基因.我就没弄清楚这两者有什么必然联

基因文库是怎么回事?
课本上说,当不知道目的基因序列的时候,则需要建立基因文库获取目的基因.
我就没弄清楚这两者有什么必然联系,建立基因文库怎么就能知道目的基因的碱基序列了?麻烦谁能通俗地解释一下, xys0525 1年前他留下的回答 已收到4个回答

鱼香肉猫 网友

该名网友总共回答了26个问题，此问答他的回答如下：采纳率：88.5%

首先理清基因文库的概念 他可不是基因库.“基因文库一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后,将酶切片段插入到载体DNA分子中,所有这些插入了基因组DNA片段的载体分子的集合体,将包含这个生物体的整个基因组,也就是构成了这个生物体的基因文库.”基因文库方法不是建立基因文库就获取了目的基因,而是通过建立了基因文库再利用探针在基因文库的大海中搜寻一定包含的目的基因.在基因文库中,不同的 DNA片段都分别在不同的克隆中扩增了,只要有该基因的探针存在,则从许多克隆中筛选一个所需的克隆是一项比较简单的工作.此外基因文库中被克隆的 DNA都是基因组中各种随机的顺序片段,某些 DNA片段还包括基因外部的邻近的甚至互相跨叠的序列,所以基因文库特别有利于研究天然状态下基因的顺序组织.所以它是获取真核目的基因的一种有效手段,常用于生产实践.不知道这样解释楼主能明白么.我以后打算当生物老师呢,
补充：基因文库主要目的是分离目的基因,只不过直接从真核细胞中分离很麻烦,但是基因文库方便分离（见上）,所以他是需要已知序列的探针,哪怕只是目的基因序列的一部分的探针也可以,只要能识别目的基因就行.
书上的意思应该是目的基因的核苷酸序列未知（包括内含子、TATA框相应基因序列等等完整序列未知）,但是探针、mrna是已知的（它们不完整,只能用来识别目的基因,不能替代目的基因,也不能直接用来合成,否则外显子、调控序列与目的基因会有不小的差异）
因为真正的未知序列想要制备分离就很麻烦了：一般情况是将你要做的东西,丢到ncbi里面进行搜索,然后收集序列,最好选择与你做的基因的来源亲缘关系近的物种,选择出来后在ncbi中进行blast进行比对,然后找到保守序列,设计简并引物,可以从基因组中扩增也可以从rna进行扩增,如果扩增的得到的不是全基因序列,可以用walking等方法扩增得到全基因序列.得到序列后你就可以进行转化表达,分析功能了
如果你的东西DNA水平的同源性比较低的话,就要多找很多序列进行分析,然后找到比较保守的block区域.可以用codehop在线网站进行block的寻找和简并引物的设计

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quehb 网友

该名网友总共回答了12个问题，此问答他的回答如下：

"建立基因文库怎么就能知道目的基因的碱基序列了"这样的理解是错误的。基因文库，就相当于一个图书馆；目的基因，相当于一本你要找的书。但这个图书馆的管理不怎么样，所以想要马上找到目的基因是相当困难的。必须用基因探针等方法，经过复杂细微的过程，才可以得到目的基因。...

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xiadengyu 网友

该名网友总共回答了1个问题，此问答他的回答如下：

基因文库是指某一生物类型全部基因的集合。这种集合是以重组体形式出现。某生物DNA片段群体与载体分子重组，重组后转化宿主细胞，转化细胞在选择培养基上生长出的单个菌落(或噬菌斑)(或成活细胞)即为一个DNA片段的克隆。全部DNA片段克隆的集合体即为该生物的基因文库。 构建基因文库的意义不只是使生物的遗传信息以稳定的重组体形式贮存起来，更重要的是它是分离克隆目的基因的主要途径。对于复杂的染色体DNA分子...

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中山浪网 网友

该名网友总共回答了12个问题，此问答他的回答如下：

基因文库简单说就是将细胞中的所有DNA用酶切成小片段，并将每一段利用载体转入宿主细胞中，这样经过培养后，每一个菌株都含有一小段DNA，再利用特殊方法将要检查的目的基因挑选出来菌株，提取DNA后进行测序，
之所以用基因文库是因为，直接测基因组DNA，太大了，测不准，而利用载体进入宿主细胞之后，DNA片段可以随宿主细胞一起复制，可以得到很多相同的拷贝，方便检查...

1年前他留下的回答

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