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电泳DNA时,拖尾现象很严重,造成这种现象的原因有哪些?

网站编辑:上海建站网 发布时间:2022-05-14  点击数:
导读:电泳DNA时,拖尾现象很严重,造成这种现象的原因有哪些? 我爱吃香菇 1年前他留下的回答 已收到1个回答 -剑吼西风- 网友 该名网友总共回答了22个问题,此问答他的...

电泳DNA时,拖尾现象很严重,造成这种现象的原因有哪些?

我爱吃香菇 1年前他留下的回答 已收到1个回答

-剑吼西风- 网友

该名网友总共回答了22个问题,此问答他的回答如下:采纳率:77.3%

电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:
1、PCR产物自身原因:
往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.
对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度.
2、电泳体系的问题:
(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.(3)电压太高.(4)适当把你的胶的浓度加大.(根据你的片断大小而定)(5)观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照.

1年前他留下的回答

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