基因疫苗质粒载体的构建

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莫招奴 网友

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获得准确的抗原编码基因并将它插入到合适的载体DNA上,是发展基因疫苗的主要工作. 1、编码抗原蛋白基因的分离 制备DNA疫苗首先要获得编码抗原的基因,一般选择编码病原体表面糖蛋白的基因.抗原蛋白产生后可在宿主体内正确糖基化,从而诱导对病原体的免疫应答反应；对于易变异的病原体,最好选择各种变型都具有的核心蛋白保守的DNA序列,这样可对各种变异的病原体产生免疫应答反应,避免因病原体变异产生的免疫逃避问题. 2 目的基因质粒的载体构建 基因疫苗大多采用质粒作载体.一般说来,基因疫苗质粒载体至少包括5个主要的部件：（1）细菌复制子,以便质粒DNA在细菌体内复制扩增,得到大量的拷贝,但不能在宿主细胞（真核细胞）中复制；（2）原核生物选择性标记基因,如抗生素抗性基因,以筛选含有质粒DNA的阳性细菌克隆（菌株）；（3）真核生物的启动子、增强子、终止子、内含子等转录调控元件；（4）编码抗原蛋白的目的基因序列；（5）多聚核苷酸信号序列,以保证mRNA翻译时适时终止.另外,基因疫苗质粒载体通常含有一段未甲基化的CpG序列,其具有刺激Th1细胞的免疫活性

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